转染绿色荧光蛋白EGFP的稳转过表达某基因的细胞株一定会发绿光吗?筛选的稳转株,鉴定了是过表达基因了,可是不绿啊?有这种可能吗?这种可能性一般占百分之几?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 20:42:34
转染绿色荧光蛋白EGFP的稳转过表达某基因的细胞株一定会发绿光吗?筛选的稳转株,鉴定了是过表达基因了,可是不绿啊?有这种可能吗?这种可能性一般占百分之几?

转染绿色荧光蛋白EGFP的稳转过表达某基因的细胞株一定会发绿光吗?筛选的稳转株,鉴定了是过表达基因了,可是不绿啊?有这种可能吗?这种可能性一般占百分之几?
转染绿色荧光蛋白EGFP的稳转过表达某基因的细胞株一定会发绿光吗?
筛选的稳转株,鉴定了是过表达基因了,可是不绿啊?有这种可能吗?这种可能性一般占百分之几?

转染绿色荧光蛋白EGFP的稳转过表达某基因的细胞株一定会发绿光吗?筛选的稳转株,鉴定了是过表达基因了,可是不绿啊?有这种可能吗?这种可能性一般占百分之几?
理论上来说,稳转EGFP过表达细胞是肯定会发绿光的,因为一般表达EGFP的启动子是广谱性启动子.当然,如果你们改了特异性启动子的另当别论.
但是不排除其荧光表达量较弱,或者还没有到查看荧光的时间.你可以过一段时间,或者调整下荧光显微镜,再看看.虽然是稳转株,但是传代次数多了以后,荧光也会出现丢失.

怎么稳转的,插入到基因组里去的吗?

万群有可能,因为基因表达需要条件,具有基因不一定能够有对应表现型。至于比例,那就要问专业人员了

怎么鉴定的呢

你怎么确定是稳定过表达的?northern ,RT-PCR,real-time RT-PCR 还是western?
RNA层面的过表达,在蛋白水平上可不一定哈!

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