Bradford法测蛋白浓度(考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度)严重非线性请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 06:35:50
Bradford法测蛋白浓度(考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度)严重非线性请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐

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Bradford法测蛋白浓度(考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度)严重非线性
请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐标值上升越为缓慢,这是什么原因?做了数次都是同样结果.真郁闷

Bradford法测蛋白浓度(考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度)严重非线性请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐
Bradford assay的线形关系有一定限制,在2 µg/ml 到 120 µg/ml之间才存在线形关系.你首先要确定你的稀释倍数是不是符合标准.
另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.考马斯亮蓝的显色原理好像是由于考马斯亮蓝分子与某两个氨基酸的基团(具体不记得了)发生反应.如果你这是混合蛋白的话,蛋白的氨基酸构成比例也有很大差异的话,很可能得不到直线.
不过看你的曲线还有一定趋势,估计你是稀释的倍数不符合标准.

1)BSA的稀释方法;
2)反应时间及样品是否混匀

我也是一样的不能用

用 excel的散点图拟合直线
bsa 梯度为倍比稀释

傻啊,这样才是对的啊,直线是错的,一般吸光度超过0.6就不是直线了,而趋向平缓,可以说是半s型曲线。把不是直线的点舍去就可以了

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