为什么用碱法提取质粒,电泳后没有出现条带呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 06:26:29
为什么用碱法提取质粒,电泳后没有出现条带呢?

为什么用碱法提取质粒,电泳后没有出现条带呢?
为什么用碱法提取质粒,电泳后没有出现条带呢?

为什么用碱法提取质粒,电泳后没有出现条带呢?
嘛,这个原因多了
1、你确定你提取质粒收的菌没有被污染?我曾经就遇上过这种事,提了N遍都没结果,泪奔……最后重新挑单菌落接种重提.你得确定你的菌里面有质粒哦~
2、你琼脂糖凝胶浓度和质粒大小相配么?假如浓度太低的话没跑一会条带就跑出胶外了~还有,你跑了多少时间?
3、你SolutionII和SolutionIII是不是超时了?或者震荡太剧烈弄成碎片了?
4、如果提取质粒的是DH5a的菌可以省下酚氯仿抽提这步,你看看是不是这部出问题了?
5、无水乙醇沉淀时候最好冰浴20分钟,我后来发现用预冷的无水乙醇沉淀效果不如冰浴好.
6、70%乙醇洗涤,嘛,你要是取质粒来做转化的洗不洗也罢.你可以先不洗,先检测你是否提出来了
7、无水乙醇挥发了再加水——切记这点

是不是跑得时间太短,质粒在点样空还没有跑出去?

那就是没有吧

1.做胶的时候没加EB或其他染料。
2.胶浓度太低,电泳时间过长,跑出去了。
3.你提的菌中根本就没有质粒。
4.产物中乙醇含量过高,点样时漂出孔。

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